顯微鏡的基本構(gòu)造
光學(xué)顯微鏡由目鏡，物鏡，粗準(zhǔn)焦螺旋，細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，壓片夾，通光孔，遮光器，轉(zhuǎn)換器，反光鏡，載物臺(tái)，鏡臂，鏡筒，鏡座，聚光器，光闌組成。
顯微鏡分類
光學(xué)顯微鏡
通常皆由光學(xué)部分、照明部分和機(jī)械部分組成。無(wú)疑光學(xué)部分是最為關(guān)鍵的，它由目鏡和物鏡組成。早于1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。光學(xué)顯微鏡的種類很多，主要有明視野顯微鏡(普通光學(xué)顯微鏡)、暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡、偏光顯微鏡、微分干涉差顯微鏡、倒置顯微鏡。
電子顯微鏡
電子顯微鏡有與光學(xué)顯微鏡相似的基本結(jié)構(gòu)特征，但它有著比光學(xué)顯微鏡高得多的對(duì)物體的放大及分辨本領(lǐng)，它將電子流作為一種新的光源，使物體成像。自1938年Ruska發(fā)明第一臺(tái)透射電子顯微鏡至今，除了透射電鏡本身的性能不斷的提高外，還發(fā)展了其他多種類型的電鏡。如掃描電鏡、分析電鏡、超高壓電鏡等。結(jié)合各種電鏡樣品制備技術(shù)，可對(duì)樣品進(jìn)行多方面的結(jié)構(gòu) 或結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的深入研究。顯微鏡被用來(lái)觀察微小物體的圖像。常用于生物、醫(yī)藥及微小粒子的觀測(cè)。電子顯微鏡可把物體放大到200萬(wàn)倍。臺(tái)式顯微鏡,主要是指?jìng)鹘y(tǒng)式的顯微鏡,是純光學(xué)放大，其放大倍率較高，成像質(zhì)量較好，但一般體積較大,不便于移動(dòng),多應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi),不便外出或現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
便攜式顯微鏡
便攜式顯微鏡,主要是近幾年發(fā)展出來(lái)的數(shù)碼顯微鏡與視頻顯微鏡系列的延伸。和傳統(tǒng)光學(xué)放大不同,手持式顯微鏡都是數(shù)碼放大,其一般追求便攜,小巧而精致,便于攜帶;且有的手持式顯微鏡有自己的屏幕,可脫離電腦主機(jī)獨(dú)立成像,操作方便,還可集成一些數(shù)碼功能,如支持拍照,錄像,或圖像對(duì)比,測(cè)量等功能。
數(shù)碼液晶顯微鏡，最早是由博宇公司研發(fā)生產(chǎn)的，該顯微鏡保留了光學(xué)顯微鏡的清晰，匯集了數(shù)碼顯微鏡的強(qiáng)大拓展、視頻顯微鏡的直觀顯示和便攜式顯微鏡的簡(jiǎn)潔方便等優(yōu)點(diǎn)。
掃描隧道顯微鏡
掃描隧道顯微鏡亦稱為“掃描穿隧式顯微鏡”、“隧道掃描顯微鏡”，是一種利用量子理論中的隧道效應(yīng)探測(cè)物質(zhì)表面結(jié)構(gòu)的儀器。它于1981年由格爾德·賓寧(G.Binning)及海因里希·羅雷爾(H.Rohrer)在IBM位于瑞士蘇黎世的蘇黎世實(shí)驗(yàn)室發(fā)明，兩位發(fā)明者因此與恩斯特·魯斯卡分享了1986年諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)。
它作為一種掃描探針顯微術(shù)工具，掃描隧道顯微鏡可以讓科學(xué)家觀察和定位單個(gè)原子，它具有比它的同類原子力顯微鏡更加高的分辨率。此外，掃描隧道顯微鏡在低溫下(4K)可以利用探針尖端精確操縱原子，因此它在納米科技既是重要的測(cè)量工具又是加工工具。
STM使人類第一次能夠?qū)崟r(shí)地觀察單個(gè)原子在物質(zhì)表面的排列狀態(tài)和與表面電子行為有關(guān)的物化性質(zhì)，在表面科學(xué)、材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究中有著重大的意義和廣泛的應(yīng)用前景，被國(guó)際科學(xué)界公認(rèn)為20世紀(jì)80年代世界十大科技成就之一。
顯微鏡的使用方法
顯微鏡的使用
利用自然光源鏡檢時(shí)，最好用朝北的光源，不宜采用直射陽(yáng)光;利用人工光源時(shí)，宜用日光燈的光源。
鏡檢時(shí)身體要正對(duì)實(shí)習(xí)臺(tái)，采取端正的姿態(tài)，兩眼自然張開(kāi)，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時(shí)載物臺(tái)不可傾斜，因?yàn)楫?dāng)在五套載物臺(tái)傾斜時(shí)，液體或油易流出，既損壞了標(biāo)本，又污染載物臺(tái)，也影響檢查結(jié)果。
鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。
顯微鏡的重光為對(duì)光，接物鏡的轉(zhuǎn)換及光線的調(diào)節(jié)。觀察寄生蟲(chóng)標(biāo)本時(shí)，光線調(diào)節(jié)甚為重要。因?yàn)樗^察的標(biāo)本如蟲(chóng)卵、包囊等，均為自然光狀態(tài)的物體，有大有小，色澤有深有淺，有的無(wú)色透明，而低倍、高倍接物鏡轉(zhuǎn)換較多，故須隨著鏡檢時(shí)對(duì)不同標(biāo)本和要求，需要隨時(shí)調(diào)節(jié)焦距和光線，這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無(wú)色或未染色標(biāo)本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。
1. 對(duì)光
：(1)將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。
(2)撥動(dòng)反光鏡，調(diào)節(jié)至視野最亮無(wú)陰影。反光鏡有平、凹兩面，光源強(qiáng)時(shí)用平面，較暗時(shí)用凹面，需要強(qiáng)光時(shí)，將聚光器提高，光圈放大;需要弱光時(shí)，將聚光器降低，或光圈適當(dāng)縮小。
(3)將待觀察的標(biāo)本置載物臺(tái)上，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標(biāo)本。于轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器的同時(shí)，須俯身在鏡旁仔細(xì)觀察接物鏡與標(biāo)本之間的距離。
(4)左眼于接目鏡觀察，同時(shí)左手轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)，使鏡筒徐徐上升以調(diào)節(jié)焦距，使視野內(nèi)的物象看到上時(shí)即停，再調(diào)微調(diào)節(jié)器，至標(biāo)本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié)：
顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡，即低倍、高倍及油鏡，固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤(pán)孔中。觀察標(biāo)本時(shí)，先使用低倍接物鏡，此時(shí)，視野較大，標(biāo)本較易查出，但放大倍數(shù)較小(一般放大100倍)，較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大(一般放大400倍)，能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。
寄生蟲(chóng)的蠕蟲(chóng)卵，微絲蚴，原蟲(chóng)的滋養(yǎng)體及包囊，昆蟲(chóng)的幼蟲(chóng)，均使用低、高倍鏡。組織細(xì)胞內(nèi)的原蟲(chóng)，則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察，如在低倍鏡下不能準(zhǔn)確鑒定所見(jiàn)的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時(shí)，則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。使用油鏡觀察，一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀察。
3. 低倍、高倍、油鏡頭的識(shí)別：
(1)標(biāo)明放大倍數(shù)10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。
(2)低倍鏡最短，高倍鏡較長(zhǎng)，油鏡最長(zhǎng)。
(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大，高倍鏡較大，油鏡最小。
(4)油鏡頭上�？逃泻谏h(huán)圈，或“油”字。
4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法：
(1)光線對(duì)好后，移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀察的標(biāo)本。
(2)如標(biāo)本的體積較大，不能清楚查見(jiàn)其構(gòu)造因而不能確認(rèn)時(shí)，則將標(biāo)本移至視野中央，再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。
(3)旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
(4)調(diào)節(jié)聚光器及光圈，使視野內(nèi)的物象達(dá)到最清晰的程度。
5. 油鏡的使用方法：
(1)原理：使用油鏡觀察時(shí)，需加香柏油，因?yàn)橛顽R需要進(jìn)入鏡頭的光線多，但油鏡的透氣孔最小，這樣進(jìn)入的光線就少，物體不易看清楚。同時(shí)又因自玻片透過(guò)的光線，由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片：n=1.52，空氣：n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光，因此射入鏡頭的光線就更少，物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油，加于標(biāo)本與玻片之間，使光線不通過(guò)空氣，這樣射入鏡頭的光線就較多，物象就看得清楚。
(2)油鏡的使用：
a.將光線調(diào)至最強(qiáng)程度(聚光器提高，光圈全部開(kāi)放)。
b.轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升，滴香柏油1小滴(不要過(guò)多，不要涂開(kāi))于接物鏡正下方標(biāo)本上。
c.轉(zhuǎn)動(dòng)接物鏡轉(zhuǎn)換盤(pán)，使油鏡頭于鏡筒下方。
d.俯身鏡旁側(cè)面在肉眼的觀察下，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內(nèi)，輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使油鏡頭徐徐上升至見(jiàn)到標(biāo)本的物象為止。
f.轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器，使視野物象達(dá)到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器，并轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器以觀察標(biāo)本。
h.標(biāo)本觀察完畢后，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器將鏡筒升起，取下標(biāo)本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。
6. 注意事項(xiàng)：
(1)使用顯微鏡之前，應(yīng)熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法，特別應(yīng)掌握識(shí)別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲(chóng)學(xué)實(shí)習(xí)中所觀察的標(biāo)本，大多數(shù)為無(wú)色和顏色較淺，因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。
(3)新鮮標(biāo)本觀察時(shí)，須加蓋玻片，以免標(biāo)本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡，同時(shí)可使標(biāo)本表面勻平，光線得以集中，有利于觀察。
顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法經(jīng)典例題
將寫(xiě)有“生物”字樣的臨時(shí)玻片標(biāo)本放在顯微鏡下觀察，正確操作應(yīng)看到的圖像是
答案 :
D
請(qǐng)根據(jù)下圖回答相關(guān)問(wèn)題.
(1)圖①中，轉(zhuǎn)動(dòng)[ ]粗準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，鏡筒的升降范圍較大.
(2)臨時(shí)裝片的制作主要有擦片、滴液、取材、 蓋片、染色五步，圖②是其中的哪一步驟? ________
(3)制作人體口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片時(shí)，需要染色(如圖③)，通常所用的染液是________.
(4)圖④和圖⑤中，哪一幅是觀察班的人體口腔上皮細(xì)胞? ________.因?yàn)槿梭w口腔上皮細(xì)胞沒(méi)有________ (寫(xiě)出一點(diǎn)即可).
(5)圖④中，在顯微鏡下看到的顏色最深的是細(xì)胞中的哪一結(jié)構(gòu)? ________
答案 :
(1)6(2)蓋片(3)碘液(4)⑤細(xì)胞壁(5)細(xì)胞核
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